WEN-CHEN SUEN, et al., "Improved activity and thermostability of Candida antarctica lipase В by DNA family shuffling", Protein Engineering, Design & Selection, 2004, vol. 17, no. 2, pp.133-140. LUTZ S "ENGINEERING LIPASE В FROM CANDIDA ANTARCTICA", Tetrahedron: Asymmetry, Vol.15, No.18, 20.09.2004, pp.2743-2748. NINGYAN ZHANG, et al.,"Improving tolerance of Candida antarctica lipase В towards irreversible thermal inactivation through directed evolution", Protein Engineering, 2003, vol.16, no.8, pp.599-605. JENNY OTTOSSON, et al., "Rational design of enantioselective enzymes requires considerations of entropy", Protein Science, 2001, Vol.10, No.9, pp.1769-1774. MAGNUSSON A., et al., "Creating space for large secondary alcohols by rational redesign of Candida antarctica lipase B", A European journal of chemical biology, Jun. 2005, Vol.6, No.6, pp.1051-1056. SU 1806196 A3, 30.03.1993. SU 1430888 A1, 15.10.1988. WO 9524459 A1, 14.09.1995. WO 9426855 A1, 24.11.1994.
Имя заявителя:
НОВОЗИМС А/С (DK)
Изобретатели:
ДЕ МАРИЯ Леонардо (DK) БРАСК Йеспер (DK) СКЬЕТ Михаэль (DK) ПАТКАР Шамкант Анант (DK) БОРК Ким (DK) СВЕНДСЕН Аллан (DK)
Патентообладатели:
НОВОЗИМС А/С (DK)
Приоритетные данные:
28.11.2006 DK PA200601560
Реферат
Изобретение относится к области биохимии. Описаны липолитический полипептид и способ его получения, включающий: 1) отбор родительской липазы с аминокислотной последовательностью, по меньшей мере, на 80% идентичной последовательности SEQ ID NO:1, представленной в описании; 2) отбор, по меньшей мере, одного аминокислотного остатка в последовательности; 3) изменение аминокислотной последовательности, где изменение включает одно или более из следующего: N74Q, P143S, A281S, P38S, N292Q, L1QGPL, L1QL, I285E, L147F, L147N, N292C, L140E, P143L, A146T, P280V, A283K, A284N, T103G+A148P, W104H+A148P, N74Q+A281S, V190A, L199P, T256K, T42N, R242A, V215I, T164V, L163F+T164V, D265P, P303K, R168D, A25G, V315I, T244P, K13Q, L277I, Y91S+A92S+N96S+N97*+L99V или D223G; 4) получение измененного полипептида с измененной аминокислотной последовательностью; 5) определение специфической активности липолитического фермента; и 6) отбор измененного полипептида, обладающего более высокой специфической активностью липолитического фермента, чем родительский полипептид. Также представлены способы проведения реакций, катализируемых описанной липазой, которые включают приведение реактантов во взаимодействие с указанным полипептидом, где реакцией является: гидролиз эфира карбоновой кислоты, синтез эфира карбоновой кислоты, алкоголиз эфира карбоновой кислоты или ацидолиз эфира карбоновой кислоты. Изобретение позволяет получить липазу, обладающую более высокой специфической активностью по сравнению с родительской. 4 н. и 5 з.п. ф-лы, 5 табл., 1 ил., 8 пр.
Поиск патентов
Получить полное описание патента