WANG L. et al. Chemistry and Biology, 8, 883-890, 2001. US 20050272121 A1, 08.12.2005. HSU L. et al. Bacteriol J. 158(3), 934-942, 1984.
Имя заявителя:
ЗЕ СКРИПС РЕСЕЧ ИНСТИТЬЮТ (US)
Изобретатели:
РИЮ Иоунга (US) ШУЛЬЦ Питер Г. (US)
Патентообладатели:
ЗЕ СКРИПС РЕСЕЧ ИНСТИТЬЮТ (US)
Приоритетные данные:
09.03.2006 US 60/780,973 17.03.2006 US 60/783,497 29.10.2006 US 60/855,336
Реферат
Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для получения белков с новыми свойствами, которые определяются включением в заранее заданное положение не встречающихся в природе аминокислот. В изобретении раскрывается композиция для коэкспрессии в эубактериальной клетке-хозяине ортогональной тРНК (О-тРНК) и ортогональной аминоацил-тРНК синтетазы (О-РС), которая предпочтительно аминоацилирует указанную О-тРНК интересующей неприродной аминокислотой. Композиция по изобретению состоит из двух конструкций нуклеиновой кислоты: первая конструкция содержит последовательности промотора и терминатора из гена пролин-тРНК Е coli. и происходящую из архей экспрессируемую последовательность, которая кодирует одну О-тРНК или представляет собой полицистронный оперон, а вторая конструкция содержит модифицированный промотор glnS E.coli и экспрессируемую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую О-РС. Описаны система трансляции, включающая векторные конструкции по изобретению, и способ получения представляющего интерес полипептида, содержащего не встречающуюся в природе аминокислоту в генетически определенном положении. 6 н. и 48 з.п. ф-лы, 8 ил., 7 пр.