WO 2007026000 А2, 08.03.2007. EP 2226385 A1, 08.09.2010. Ruttyn Y, Brandin MP, Vijayalakshmi MA. Chromatography of human plasma on aminohexyl Sepharose: separation of factor VIII/vWf and behaviour of factors II, VII, IX and X and antithrombin III. J Chromatogr. 1989 Jul 21; 491(2): 299-308. Т.Taakase, E.G.D.Tuddenham, S.Chand, A.H.Goodall.Monoclonal antibodies to human factor VII: production of immunodepleted plasma for VII:C assays. ClinPathol 1988; 41: 342-345.
Имя заявителя:
Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН (RU), Учреждение Российской академии медицинских наук Гематологический научный центр РАМН (RU)
Изобретатели:
Пономаренко Наталья Александровна (RU) Шамборант Ольга Георгиевна (RU) Сурина Елена Анатольевна (RU) Смирнов Иван Витальевич (RU) Мирошников Анатолий Иванович (RU) Воробьев Иван Иванович (RU) Шустер Александр Михайлович (RU) Мартьянов Виталий Афанасьевич (RU)
Патентообладатели:
Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН (RU) Учреждение Российской академии медицинских наук Гематологический научный центр РАМН (RU)
Реферат
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения рекомбинантного фактора свертываемости крови VIIa человека. Способ очистки фактора VIIa человека предусматривает создание афинного сорбента, включающего иммобилизацию антител к фактору VIIa на нерастворимой матрице, сорбцию фактора VIIa на аффинном сорбенте, последующую элюцию фактора VIIa и контроль корректности его посттрансляционной модификации и конформации. Получение аффинного сорбента достигается оптимальным сочетанием NHS-activated Sepharose 4FF как твердой основы и комбинации моноклональных антител, продуцируемых клонами 4F4 и 6В8 культивируемой гибридомы, отобранными по наиболее высокой степени выхода моноклональных антител к эпитопам кальцийсвязывающего домена в составе фактора VIIa. Контроль корректности посттрансляционной модификации и конформации фактора VIIa осуществляют иммуноферментным анализом с использованием планшет, покрытых моноклональными антителами, продуцируемыми клоном 5D9. 95%-связывание аффинного сорбента с фактором VIIa достигается через 5 минут контакта при одном цикле взаимодействия с сорбентом. Изобретение обеспечивает сокращение времени очистки фактора VIIa и затрат на этот процесс, содержит 4 примера. 4 ил., 7 табл.
Поиск патентов
Получить полное описание патента