Способ получения антиген-связывающего домена VH, в котором отсутствует удлиненная CDR3 петля, подобная петле верблюда, включает трансформирование клетки млекопитающего гетерологичным локусом тяжелой цепи VH. Локус содержит ген, кодирующий вариабельную область, по меньшей мере содержащий один сегмент гена VH, один сегмент гена D, не являющийся верблюжьим, один сегмент гена J, не являющийся верблюжьим, одну константную область тяжелой цепи, при условии, что ни один из генов, кодирующих константные области, не кодирует функциональный домен Сн1. Сегменты генов V, D и J способны к рекомбинации с образованием кодирующей последовательности VDJ. Трансформированная клетка способна экспрессировать антитело только с тяжелыми цепями, содержащими антиген-связывающий домен VH и константную эффекторную область, лишенную функционального домена Сн1. Клетку используют для получения трансгенного животного, которое иммунизируют представляющим интерес антигеном. Далее выделяют клетки или ткани, экспрессирующие специфические антитела к интересующему антигену только с тяжелыми цепями, выделяют нуклеиновую кислоту, кодирующую домен VH специфического антитела только с тяжелыми цепями, и экспрессируют указанный антиген-связывающий домен VH. Указанные VH домены могут быть использованы для создания слитых белков или связывающих комплексов моновалентного, бивалентного или мультивалентного полипептида. Изобретение позволяет получать антигенспецифические антитела человека любого класса, обладающие высокой аффинностью. 2 н. и 9 з.п. ф-лы, 26 ил.
Поиск патентов
Получить полное описание патента