На данной странице представлена ознакомительная часть выбранного Вами патента

Для получения более подробной информации о патенте (полное описание, формула изобретения и т.д.) Вам необходимо сделать заказ. Нажмите на «Корзину»

Вернуться к списку

РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК PERPINS1, КОДИРУЮЩАЯ АМИНОКИСЛОТНУЮ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ РЕКОМБИНАНТНОГО ПРОИНСУЛИНА ЧЕЛОВЕКА, И ШТАММ ESCHERICHIA COLI BL21(DE3)/PERPINS1 - ПРОДУЦЕНТ РЕКОМБИНАНТНОГО ЧЕЛОВЕЧЕСКОГО ПРОИНСУЛИНА

Номер публикации патента: 2181771

Вид документа:  C1  Страна публикации:  RU  Рег. номер заявки:  2000127682/13		Получить полное описание патента

Реферат

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генной и белковой инженерии, и решает задачу получения высокопродуктивного рекомбинантного бактериального штамма-продуцента человеческого проинсулина. Для этого штамм-реципиент трансформируют рекомбинантной плазмидной ДНК рERPIns1, которая состоит из Nde I/Hind III - фрагмента ДНК плазмиды рЕТ 20b(+), содержащего промотор и терминатор транскрипции Т7-РНК-полимеразы, усилитель трансляции гена 10 фага Т7, ген β-лактамазы, и Nde I/Hind III - фрагмента ДНК, содержащего адаптированную к этим сайтам последовательность гена рекомбинантного человеческого проинсулина. Штамм-продуцент культивируют до накопления рекомбинантного человеческого проинсулина в количестве 60-70% от суммарного белка клеток, разрушают клетки в буферном растворе и выделяют тельца включения. Штамм-продуцент Е. coli BL21 (DE3)/pERPIns выращивают в богатой среде (YT-, LB-бульон др.) (или индуцируют изопропилтио-β-D-галактозидом и снова выращивают) до достижения максимальной плотности культуры. Изобретение позволяет получать рекомбинантный человеческий проинсулин по упрощенной технологии и с высоким выходом. 2 с.п. ф-лы, 1 ил.

Вернуться к списку