|
На данной странице представлена ознакомительная часть выбранного Вами патента
Для получения более подробной информации о патенте (полное описание, формула изобретения и т.д.) Вам необходимо сделать заказ. Нажмите на «Корзину»
| РЕКОМБИНАНТНЫЙ ПОЛИПЕПТИД, СПОСОБ ИНГИБИРОВАНИЯ АГРЕГАЦИИ ТРОМБОЦИТОВ, РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК (ВАРИАНТЫ), РЕКОМБИНАНТНЫЙ ШТАММ E.COLI (ВАРИАНТЫ), СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИПЕПТИДА |  |
Номер публикации патента: 2109816 |  |
| Редакция МПК: | 6 | | Основные коды МПК: | C12N015/12 C12N001/21 C12P021/02 | | Аналоги изобретения: | Gujmuna et al.journal of Biol.Chem., 261, N 1, 381-385, 1986. |
| Имя заявителя: | Био-Текнолоджи Дженерал Корп. (US) | | Изобретатели: | Леонард Гарфинкель[US]
Тамар Рихтер[IL] | | Патентообладатели: | Био-Текнолоджи Дженерал Корп. (US) | | Номер конвенционной заявки: | 487,767 | | Страна приоритета: | US |
Реферат | |
Изобретение относится к биотехнологии и позволяет получить рекомбинантный полипептид, ингибирующий слипание и агрегацию тромбоцитов при воздействии таких условий, при которых проявляются церебровескулярные расстройства и сердечно-сосудистые расстройства. Рекомбинантный полипептид содержит область связывания GPIb фактора фон Виллебранда человека и имеет определенную аминокислотную последовательность. Способ ингибирования агрегации тромбоцитов осуществляют путем контактирования тромбоцитов с эффективным количеством рекомбинантного полипептида. Для экспрессии рекомбинантного полипептида используют рекомбинантную плазмидную ДНК pvWF-VC3 или pvWF-VCL. Каждая из ДНК содержит область связывания гликопротеина Ib фактора фон Виллебранда человека. Эта область включает фрагмент ДНК, кодирующий аминокислотную последовательность полипептида, и содержит промоторную систему deo P1P2 или промотор Pl фага ламбда, deo - сайт связывания рибосом, T1T2-терминатор транскрипции и ген устойчивости к ампициллину Amp2 в качестве генетического маркера. Продуцентами полипептида являются рекомбинантный штамм E · coli/pvWF-VC3 или IpvWF-VCL. При получении полипептида трансформируют штамм E · coli рекомбинантной плазмидной ДНК, проводят отбор и культивирование трансформантов в условиях, обеспечивающих накопление полипептида. При выделении биологически активного пептида разрушают бактериальные клетки с выделением лизата. Из лизата выделяют тельца включения с помощью денатурирующего агента или гуанидингидрохлорида, или мочевины с последующей очисткой раствора полипептида катионнообменной хроматографией. Растворенный полипептид обрабатывают дисульфидом или глутатионом, или тиоредоксином, или бета-меркаптоэтанолом, или цистеином. Полученный полипептид обрабатывают диализом, а диализат -катионно-обменной хроматографией. 7 с.п.ф-лы, 4 табл., 27 ил.
|
Поиск патентов
Получить полное описание патента