На данной странице представлена ознакомительная часть выбранного Вами патента

Для получения более подробной информации о патенте (полное описание, формула изобретения и т.д.) Вам необходимо сделать заказ. Нажмите на «Корзину»

Вернуться к списку

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИГЕНА ИЗ ВНЕШНЕЙ МЕМБРАНЫ БАКТЕРИАЛЬНЫХ КЛЕТОК

Номер публикации патента: 1415496

Вид документа:  A1  Страна публикации:  SU  Рег. номер заявки:  4010846		Получить полное описание патента

Реферат

Изобретение относится к микробиологии, касается способов выделения белков из микробной массы, предназначено для диагностики псевдотуберкулезной инфекции и защиты от нее организма. Цель изобретения - повышение степени очистки белка порина из псевдотуберкулезного микроба и упрощение способа. Для этого суспензию микробных клеток с добавленными стеклянными бусами (⊘ 1 - 1,5 мм) центрифугируют 45 мин при 600 g, осадок суспендируют в 0,03 М трис-HCl буфере, pH 7,2 (буфер А), содержащем 2% тритона Х-100, и экстрагируют при 4°С 2 ч, интенсивно перемешивая. Осадок отделяют центрифугированием при 20000 g 15 мин, промывают буфером А, суспендируют в 200 мл буфера, добавляют 1М раствор MgCl₂ и ДНК-азу и инкубируют 12 ч. Осадок отделяют центрифугированием при 20000 g 30 мин, промывают буфером А, суспендируют в буфере А, содержащем 2% додецилсульфата натрия, и 15 мин экстрагируют при 60°С. Комплекс пептидогликан-белок отделяют центрифугированием при 45000 g 1 ч. Осадок промывают, суспендируют в 100 мл буфера А, содержащего 0,5% додецилсульфата натрия и 0,5 М NaCl, осадок отделяют центрифугированием при 100000 g 30 мин, суспендируют в 50 мл буфера А, осадок отделяют центрифугированием при 150000 g 1 ч. Белок осаждают из суспернатанта 9,5 объемами холодного ацетона, выдерживают при 2 - 10°С 12 ч. Отделяют осадок, суспендируют в дистиллированной воде, лиофилизуют. Выход продукта 3,5%. Низкомолекулярные белки в нем отсутствуют.

Вернуться к списку