LIN J.H. ЕТ AL., Connexin 43 enhances the adhesivity and mediates the invasion of malignant glioma cells., J Neurosci., 2002, v.22, no.11, p.4302-4311. PESTOV N.B. ЕТ AL, Purification ofrecombinant membrane proteins tagged with calmodulin-binding domains by affinity chromatography on calmodulin-agarose: example ofnicotinamide nucleotide transhydrogenase, Nat Protoc, 2007, v.2, no.1, p.198-202.
Имя заявителя:
Федеральное государственное учреждение "Государственный Научный Центр Социальной и Судебной Психиатрии им. В.П. Сербского" (ФГУ "ГНЦССП Росздрава") (RU)
Изобретатели:
Баклаушев Владимир Павлович (RU) Гурина Ольга Ивановна (RU) Юсубалиева Гаухар Маратовна (RU) Чехонин Владимир Павлович (RU)
Патентообладатели:
Федеральное государственное учреждение "Государственный Научный Центр Социальной и Судебной Психиатрии им. В.П. Сербского" (ФГУ "ГНЦССП Росздрава") (RU)
Реферат
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу получения иммуногенного рекомбинантного экстраклеточного фрагмента коннексина-43. Изобретение может найти применение в методологии создания биологически активных антител, связывающихся с живой клеткой, адресной доставки лекарственных препаратов к клеткам-мишеням. Предложенный способ включает клонирование второй экстраклеточной петли Е2 Сх43, представляющей собой фрагмент коннексина-43 Q173-1208 с аминокислотной последовательностью QWYIYGFSLSAVYTCKRDPCPHQVDCFLSRPTEKTI, в два плазмидных вектора pCBDQ и pHPMLQ. После чего осуществляют трансформацию полученными плазмидными ДНК клеток E.coli. Затем проводят культивирование трансформированных клеток до оптической плотности 0,7-0,9. Далее осуществляют индукцию экспрессии плазмиды 0,9-1,1 мМ изопропилтиогалактозидом. После чего проводят наработку рекомбинантных белков слияния и их выделение в присутствии 7,9-8,1 М мочевины методом хроматографии на Ni-NTA агарозе. Предложенное изобретение позволяет разработать способ получения иммуногенного рекомбинантного экстраклеточного фрагмента коннексина-43 крысы в составе высокоиммуногенного химерного белка, пригодного для создания моноклональных антител. 2 ил., 1 табл.
Поиск патентов
Получить полное описание патента