SU 1836957 А1, 30.08.1993. RU 2258221 C2, 10.08.2005. CA 1065307 A1, 30.10.1979. Коптева И.И. и др. Сравнительная физико-химическая характеристика препаратов трофобластического гликопротеина, выделенных из ретроплацентарной крови // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - М.: Медицина, 1990, т. СХ, 9, с.265-267.
Имя заявителя:
Раев Михаил Борисович (RU)
Изобретатели:
Раев Михаил Борисович (RU)
Патентообладатели:
Раев Михаил Борисович (RU)
Реферат
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и может быть использовано в медицине и биотехнологии. Способ выделения и очистки трофобластического бета-1-гликопротеина (ТБГ) из сыворотки ретроплацентарной крови выполняется путем фракционирования сульфатом аммония, отмывки и центрифугирования растворенного осадка, аффинной хроматографии на сефарозе с последующей элюцией целевого продукта и его лиофилизацией, при этом ретроплацентарную кровь центрифугируют при 10000 об/мин в течение часа, к супернатанту добавляют хлорид натрия до конечной концентрации 0,1-1,0 моль/л и тритон Х-100 до конечной концентрации 0,01-0,1%, центрифугирование повторяют, полученную сыворотку насыщают сульфатом аммония до 30%, инкубируют в течение ночи при перемешивании, центрифугируют, осадок трижды отмывают 30% сульфатом аммония, суспендируют в 0,15 М фосфатно-солевом буферном растворе рН 7,0-7,5, содержащем 0,5 М хлорид натрия и 0,05% тритон Х-100, диализуют в ультрафильтрационной ячейке, пропуская 10-ти кратный объем буферного раствора, затем разводят в 5 раз и проводят ультрафильтрацию с пределом исключения 100000 Да, полученный пермеат подвергают однократной аффинной хроматографии на сефарозе с иммобилизованными моноклональными антителами к ТБГ, элюируют аффинносвязанный ТБГ 0,1М глицин-HCl буферным раствором рН 2,55, элюат немедленно нейтрализуют, концентрируют, диализуют против физраствора и лиофилизируют. Изобретение обеспечивает повышение выхода и степени чистоты целевого продукта. 1 табл.
Поиск патентов
Получить полное описание патента