RU 2416797 С2, 20.04.2011. RU 2009101693 A, 27.07.2010. KLEIN J.B. et al. Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor delays neutrophil constitutive apoptosis through phosphoinositide 3-kinase and extracellular signal-regulated kinase pathways // J.Immunol. - 2000, V.164, P.4286-4291. DEROUET M. et al. Granulocyte macrophage colony-stimulatingfactor signaling and proteasome inhibition delay neutrophil apoptosis by increasing the stability of Mcl-1 // J.Biol.Chem. - 2004, V.279, No.26, P.26915-26921. Манских В.Н. Морфологические методы верификации и количественной оценки апоптоза // Бюллетень сибирской медицины. - 2004, 1, с.63-70. Долгих О.В., Зайцева Н.В., Дианова Д.Г. Аннексин-индуцированный апоптоз в условиях производственной среды // Материалы XLV научно-практической конференции с международным участием «Гигиена, организация здравоохранения и профпатология» и семинара «Актуальные вопросы современной профпатологии». - Новокузнецк: 17-18 ноября 2010 г, с.102-103.
Имя заявителя:
Федеральное бюджетное учреждение науки "Федеральный научный центр медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения" (ФБУН "ФНЦ медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения") (RU)
Изобретатели:
Зайцева Нина Владимировна (RU) Долгих Олег Владимирович (RU) Дианова Дина Гумяровна (RU) Лыхина Татьяна Станиславовна (RU) Кривцов Александр Владимирович (RU) Гугович Алеся Михайловна (RU) Харахорина Регина Атласовна (RU)
Патентообладатели:
Федеральное бюджетное учреждение науки "Федеральный научный центр медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения" (ФБУН "ФНЦ медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения") (RU)
Реферат
Изобретение относится к области медицины и описывает способ количественной оценки апоптоза, модифицированного органическими низкомолекулярными соединениями, включающий отбор пробы крови у пациента, выделение из пробы мононуклеарных клеток и инкубацию клеток с исследуемым соединением, где выделение из пробы мононуклеарных клеток производят путем введения в пробу этилендиаминтетраацетата, разведения ее водным раствором хлорида натрия, наслоения на 3 мл фиколла-урографина с градиентом плотности 1,077 г/мл, с последующим центрифугированием в течение 30 мин при 1500 об/мин и отбором мононуклеарных клеток, затем производят двукратный отмыв выделенных клеток раствором хлорида натрия и проводят ресуспендирование указанных клеток в рабочем растворе буфера для окрашивания 1X Annexin V Binding Buffer до концентрации 1×106 клеток/мл, при этом рабочий раствор буфера для окрашивания 1X Annexin V Binding Buffer представляет собой смесь концентрированного буфера для окрашивания 10Х Annexin V Binding Buffer с дистиллированной водой в объемном соотношении 1:9 соответственно, затем осуществляют инкубацию полученных клеток с исследуемым органическим низкомолекулярным соединением, получая опытный образец, и осуществляют инкубацию полученных клеток без добавления указанного соединения, получая контрольный образец, при этом инкубацию полученных клеток с исследуемым органическим низкомолекулярным соединением и без него проводят в течение 1 часа при температуре 37°С, после инкубации в опытный и контрольный образцы вводят реагенты аннексии V и йодид пропидия, образцы вновь инкубируют в темноте при комнатной температуре в течение 15 мин, добавляют рабочий раствор буфера для окрашивания 1X Annexin V Binding Buffer и осуществляют цитометрический анализ полученных образцов с определением содержания в них аннексина V, сравнивают численные величины содержания аннексина V в контрольном и опытном образцах и по соотношению большего числа содержания аннексина V к меньшему количественно оценивают апоптоз, модифицированный органическим низкомолекулярным соединением, причем при указанном соотношении, равном 1,5 и более, судят об апоптозе - критическом состоянии запрограммированной клеточной гибели в связи с влиянием указанного органического соединения. Способ обеспечивает высокую точность количественной оценки апоптоза, модифицированного органическими низкомолекулярными соединениями, с обеспечением возможности в последующем судить об иммунодефицитных состояниях населения. 2 з.п. ф-лы, 1 табл., 1 пр.
Поиск патентов
Получить полное описание патента