НУКЛЕОТИДНАЯ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ, КОДИРУЮЩАЯ ИММУНОГЕННЫЙ ПОЛИПЕПТИД LcrV(G113), ВЫЗЫВАЮЩИЙ ЗАЩИТНЫЙ ИММУННЫЙ ОТВЕТ ПРОТИВ Yersinia pestis; РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pETV - I - 3455, КОДИРУЮЩАЯ ИММУНОГЕННЫЙ ПОЛИПЕПТИД LcrV(G113); РЕКОМБИНАНТНЫЙ ШТАММ Escherichia coli BL21(DE3)/pETV - I - 3455 - ПРОДУЦЕНТ ИММУНОГЕННОГО ПОЛИПЕПТИДА LcrV(G113); ПОЛИПЕПТИД LcrV(G113) И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ
Anisimov А.Р. et al. Intraspeciflc diversity of Yersinia pestis. Clin // Microbiol. Rev. - 2004, v. 17, N2, p.434-464. US 6638510 B1, 28.10.2003. WO 2006060728 A2, 08.06.2006. RU 2197988 C2, 20.10.1999.
Имя заявителя:
Федеральное государственное учреждение науки Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии (ФГУН ГНЦ ПМБ) (RU)
Изобретатели:
Копылов Павел Христофорович (RU) Бахтеева Ирина Викторовна (RU) Анисимов Андрей Павлович (RU) Дентовская Светлана Владимировна (RU) Иванов Сергей Андреевич (RU) Киселева Наталья Владимировна (RU) Левчук Владимир Павлович (RU) Панферцев Евгений Александрович (RU) Платонов Михаил Евгеньевич (RU) Светоч Татьяна Эдуардовна (RU) Титарева Галина Михайловна (RU)
Патентообладатели:
Федеральное государственное учреждение науки Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии (ФГУН ГНЦ ПМБ) (RU)
Реферат
В изобретении раскрыта нуклеотидная последовательность (фиг.2), кодирующая иммуногенный полипептид LcrV(G113), на основе которой сконструирована рекомбинантная плазмидная ДНК pETV-I-3455, имеющая размер 6538 п.н., кодирующая иммуногенный полипептид LcrV(G113). Плазмида состоит из репликона плазмиды pBR322, гена -лактамазы, определяющего устойчивость к ампициллину, Т7-промотора, 1ас-оператора, fl-репликона и фрагмента ДНК, фланкированного сайтами для рестриктаз Ndel и HindIII, кодирующего синтез белка LcrV(G113), начинающегося с инициирующего кодона ATG. Описан рекомбинантный штамм бактерий Е. coli BL21(DE3)/pETV-I-3455 - продуцент иммуногенного полипептида LcrV(G113) с аминокислотной последовательностью, представленной на фиг.3, где триптофан в позиции 113 (W113) заменен на глицин. Раскрыт способ получения указанного полипептида путем культивирования штамма Е. coli BL21(DE3)/pETV-I-3455. Клетки разрушают в буферном растворе ультразвуком и выделяют полипептид последовательно гель-проникающей хроматографией с использованием носителя TSK HW-40, анионообменной и гидрофобной хроматографией. Изобретение позволяет получить продукт с высокой иммуногенной и протективной активностью. 5 н.п. ф-лы, 8 ил., 2 табл.