SANCHEZ J.A. ЕТ AL, Linear-after-the-exponential (LATE)-PCR: an advanced method of asymmetric PCR and its uses in quantitative real-time analysis, Proc Natl Acad Sci USA, 2004, v.101, T.7, p.1933-1938, см.стp.1933-1934, 1936, 1938. PIERCE K.E. ЕТ AL, Detection of cystic fibrosis alleles from single cells using molecular beacons and a novel methodof asymmetric real-time PCR, Molecular Human Reproduction, 2003, v.9, n. 12, p.815-820. US 5994056 A, 30.11.1999. WO 02097132 A2, 05.12.2002. WO 0131062 A1, 03.05.2001. US 2004053254 A1, 18.03.2004.
Имя заявителя:
БРАНДЕЙС ЮНИВЕСИТИ (US)
Изобретатели:
ПИРС Кеннет (US) РАЙС Джон (US) РЕЙС Артур (US) САНЧЕС Акилес Дж. (US) СОЛК Джесс (US) УОНГ Лоренс Дж. (US)
Патентообладатели:
БРАНДЕЙС ЮНИВЕСИТИ (US)
Приоритетные данные:
18.10.2004 US 60/619,654
Реферат
Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу гомогенной детекции со сниженным разбросом данных по меньшей мере одного продукта одноцепочечной амплификации. Способ включает получение реакционной смеси амплификации, содержащей по меньшей мере одну последовательность-мишень из нуклеиновой кислоты, праймер указанной последовательности, гибридизационный зонд указанной последовательности, флуоресцентный краситель ДНК и реагенты, необходимые для амплификации. Проводят амплификацию указанной последовательности-мишени из нуклеиновой кислоты с помощью указанного процесса несимметричной амплификации нуклеиновых кислот с образованием одноцепочечных и двухцепочечных ампликонов. Затем двухцепочечные ампликоны детектируют посредством флуоресцентного красителя ДНК, а по меньшей мере один указанный одноцепочечный ампликон детектируют посредством меченного флуорофором гибридизационного зонда при температуре ниже температуры отжига праймера последовательности-мишени. После чего нормализуют специфичный для последовательности флуоресцентный сигнал в виде рассчитанного отношения флуоресценции указанного одноцепочечного продукта к флуоресценции указанных двухцепочечных ампликонов. Предложенное изобретение позволяет осуществить гомогенную детекцию со сниженным разбросом данных продукта одноцепочечной амплификации процесса несимметричной амплификации нуклеиновых кислот. 8 з.п. ф-лы, 24 ил., 16 пр.
Поиск патентов
Получить полное описание патента